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近日，有客戶咨詢公司的業(yè)務(wù)員，ELISA實驗中標(biāo)板整體背景高有什么好的處理方式嗎？下面就請我司技術(shù)專員為您答疑！
近日，有客戶在做完實驗后，反映陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的？我司技術(shù)整理后給出如下解析，邀您來看看！
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）中的溫育是一個至關(guān)重要的步驟，它直接影響到抗原與抗體在固相表面的結(jié)合效率，進(jìn)而影響整個實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是關(guān)于ELISA溫育的詳細(xì)解釋：
將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備，見前）。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面，經(jīng) 42℃ 短時間熱沖擊處理，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時后，球狀細(xì)胞復(fù)原并分裂增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中，外源基因得到表達(dá)。在選擇性培養(yǎng)平板上，可選出所需的轉(zhuǎn)化子（即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌）。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞，一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ～ 10 6 個轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外，還有電穿孔法（ Electroporation ），其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ～ 10 10 個轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。
ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題，那么，ELISA試劑盒變質(zhì)是因為什么呢？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會有什么影響呢？恒遠(yuǎn)生物為大家詳細(xì)分析下。
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